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TSI: TRIPLE SUGAR IRON: GLUCOSA, SACAROSA Y LACTOSA. KLIGER: LACTOSA Y GLUCOSA.

INDICADOR ROJO FENOL PH (ROJO ALCALINO, AMARILLO ACIDO)

Si la baceria produce ácido sulfhídrico con la sal de amonio forma acido ferroso de color negruzco

cámara inclinada y fondo.
AGAR TSI & KLIGER 18-48 horas
Estudia la capacidad de una bacteria de reducir nitrato a nitrógeno libre.
1era etapa: alfanaftilamina al 0,5% 1ml y ácido
sulfónico al 0,8% 1ml. COLOR ROJO POSITIVO

2da etapa. Polvo de zinc. Rosado intenso negativo (porque zinc pasa nitrato a nitrito). Positivo cuando no hay color
resultado positivo: E. Coli
resultado negativo: Acinetobacter baumannii
REDUCCION DE NITRATO 18-48h
La prueba es útil para identificar las bacterias que poseen la enzima
ADNasa de aquellas que no la poseen.
El ADN hidrolizado presenta transparencia a diferencia del ADN polimerizado que torna
opaco el medio en el que se encuentra si no se utiliza el azul de toluidina. La prueba es
positiva cuando se observan zonas claras definidas alrededor de las estrías de siembra
si se emplea el azul de toluidina

Staphylococcus aereus: desoxirribonucleasa y endonucleasa. Serratia y Pseudomonas
PRUEBA ADNasa 18-48h
Mide la capacidad de algunas bacterias para producir una enzima capaz de descarboxilar un aminoácido. Se utiliza para identificar bacilos gramnegativos, bacilos grampositivos y cocos grampositivos. En la descarboxilación, la enzima descarboxilasa ataca el
extremo carboxilo del aminoácido y dormán aminos. Los aminoácidos usados para identificar son la arginina, la ornitina y principalmente la lisina.
La descarboxilación de la lisina y de la ornitina dan como producto final la cadaverina y la putracina, mientras que la descarboxilación de la arginina da citrulina por acción de la deshidrolasa.


descarboxilación: anaeróbica. Púrpura de bromocresol. Fermentación de glucosa (medio acido, se pone amarillo). Luego el medio acido contribuye a la descarboxilación que produce aminos que aumentan el ph (más alcalino) y produce cambio de amarillo a violeta rojo

Negativo: Amarillo
Positivo: Violeta
PRUEBA DE DESCARBOXILASA 18-48
Utilizada para diferenciar Enterobacterias. el indicador utilizado es el azul de bromotimol. El caldo contiene sulfato de amonio, dextrosa, extracto de levadura y malonato de sodio.
aerobiosis. debe cumplirse 48h.

Esta mide la capacidad de algunas bacterias de

El azul de bromotimol según la escala de pH

La prueba suele dar positivo: Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter, en ese caso, el tubo pasaría a ser de un color azul.

Escherichia, Salmonella, Cerratia, Yersinia, Shigella y
Proteus no utilizan el malonato, pero son capaces y crecer en este medio gracias a la dextrosa. VERDE NEGATIVO.

Dextrosa (acido) más peptonas (alcalino): verde.
Dextrosa (acido) sin peptonas (alcalino): amarillo
Efecto buffer: utilizar el malonato de sodio como única fuente de carbono, y al sulfato de amonio como única fuente de nitrógeno efecto tampón y produciendo hidróxido de sodio, lo que origina un medio alcalino. AZUL
PRUEBA DEL MALONATO 18-48h
Esta principalmente determina la capacidad de la bacteria de producir el factor CAMP. Se usa para la identificación presuntiva de los Streptococcus del grupo B

La prueba se realiza en una placa de agar sangre
de conejo se traza una estría del Streptococcus
que se quiere identificar perpendicularmente a una
estría de S. aereus productora de β-hemolisis

La prueba es positiva cuando se hace más
evidente la β-hemolisis del Streptococcus en la
zona más cercana al Staphylococcus, la cual va
a tomar una forma de cabeza de flecha en el sitio de intercepción de ambas estrías, esto permite dividir los estreptococos es subgrupos A o B.



El factor CAMP es una proteína difusible extracelular y termoestable, presente, generalmente, en los estreptococos de grupo B y que, en presencia de la β-lisina (β-hemolisina o esfingomielinasa C) de Staphylococcus aureus actúan en conjunto para dar una hemólisis sinérgica
PRUEBA CAMP 18-48H
La optoquina es un derivado de la quinina:Esta sustancia inhibe selectivamente a muy baja concentración (≤5 µg/ml) el crecimiento de S. pneumoniae.

No afecta el crecimiento de Streptococcus α-
hemolíticos


La optoquina al ser hidrosoluble es capaz de difundir al medio del agar, por lo tanto, se emplea para ello discos impregnados de optoquina

zona circular de inhibición del desarrollo.
La prueba se realiza sobre una placa de agar sangre ovina.
e interpreta como
positivo si el S. pneumoniae si hay una zona de inhibición de 15 mm aproximadamente
o más entre el borde externo del disco de optoquina y el circulo azul (marcado en la
imagen). Si es menor de 10 ml se debe realizar otras pruebas para una identificación
final de otros Streptococcus α-hemolíticos
PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD A LA OPTOQUINA
Diagnostico presuntivo de Streptococcus β-hemolíticos del grupo A de Lancefield caso del Streptococcus pyogenes, ya que a
diferencia de la mayoría de los Streptococcus suelen ser sensibles a bajas
concentraciones de bacitracina)


Este es el método más usado en los laboratorios
para la identificación de este microorganismo en un
porcentaje de 5-15%



La prueba se realiza sobre una placa de agar sangre con cultivo
puro de Streptococcus, la cual se estira y se coloca un disco de
0,02-0,04 unidades de bacitracina (discos blancos),


La aparición de una zona de inhibición de
aproximadamente 15-20 mm de diámetro o mayor de 10 mm con
una zona de β-hemolisis (marcado en la imagen) se interpreta
como un resultado positivo.

El fundamento de esta prueba se basa en que la bacitracina (antibiótico) es capaz de
inhibir el crecimiento del Streptococcus pyogenes (no inhibe el desarrollo de otros
Streptococcus β-hemolíticos) a la concentración en la que se encuentra en los discos.
PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD A LA BACITRACINA
Se basa en la capacidad de determinar especies bacterianas en lisarse en presencia de sales biliares
Taurocolato y el Desoxicolato de sodio

capacidad de lisar selectivamente el Streptococcus pneumoniae.El efecto de estas enzimas autolíticas se pone en manifiesto sobre las colonias de S.
pneumoniae

a prueba se realiza tomando dos tubos:

Tubo en el cual se agrega la sustancia
Tubo control

La interpretación de una reacción positiva se dará si hay un aclaramiento visible del
cultivo turbio en 3 horas lo cual nos hará sospechar de la presencia de S. pneumoniae
a diferencia del tubo control que solo tiene solución salina estéril el cual debe permanecer
turbio. Si la prueba es positiva habrá un aclaramiento mientras el tubo control si
presenta otro tipo de Streptococcus permanecerá en tono turbio
PRUEBA DE SOLUBILIDAD EN BILIS