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Fuentes de Contaminación:
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Medio Nutritivo: Puede introducir contaminantes debido a su preparación.
Aire/Ambiente: Contaminantes del ambiente pueden entrar durante la manipulación. Operador(a): Las personas involucradas pueden ser una fuente de contaminación. Insectos y ácaros: Pequeños organismos como thrips y hormigas pueden ser portadores de contaminantes. Planta Madre/Explante: La planta madre y el explante inicial pueden llevar contaminantes.Medio Nutritivo: Puede introducir contaminantes debido a su preparación. Aire/Ambiente: Contaminantes del ambiente pueden entrar durante la manipulación. Operador(a): Las personas involucradas pueden ser una fuente de contaminación. Insectos y ácaros: Pequeños organismos como thrips y hormigas pueden ser portadores de contaminantes. Planta Madre/Explante: La planta madre y el explante inicial pueden llevar contaminantes. |
Etapas para Controlar la Contaminación:
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Identificar fuente y tipo de contaminante
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Identificar Fuente de Contaminación
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Endógena: Contaminación latente dentro del material.
Exógena: Contaminación introducida desde el exterior. |
Identificar Tipo de Contaminante:
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Relacionar contaminantes con su fuente.
Endógena: Pseudomonas. Exógena: Staphylococcus epidermidis, Micrococcus, Candida albicans. |
Control de la Contaminación:
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Destrucción del material
Salvación del material |
estrucción del Material:
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Una opción para eliminar la contaminación
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Salvación del material
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Cultivo de Meristemas: Propagación de tejido libre de contaminantes.
Uso de Químicos (Quimioterapia): No reemplazar la asepsia con antibióticos. |
Métodos para Controlar la Contaminación:
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Sustancias antimicrobianas
MEtodos Fisicos Manippulaciones invitro |
Sustancias Antimicrobianas
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Antibióticos (Rifampicina, Gentamicina), Fungicidas (Benomil, Carbendazim), Biocidas/Fungicidas (Plant Preservative Mixture - PPM).
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Métodos Físicos:
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Calor y radiaciones.
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Manipulaciones In Vitro:
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Subcultivos, ajuste del pH.
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actores que Afectan la Respuesta de los Explantes In Vitro:
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GGenotipo: Diferencias entre angiospermas y gimnospermas, monocotiledóneas y dicotiledóneas.
Edad y Estado Fisiológico: Importancia de tejidos jóvenes y embrionarios. Tamaño del Explante: Mayor tamaño puede tener reservas alimenticias y mejor regeneración. Método de Inoculación/Polaridad: Inoculación polar y apolar tienen efectos diferentes. |
Problemas fisiologicos y soluciones
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Vitrificación: Tejidos translúcidos e hiperhidratados. Soluciones incluyen cambiar concentraciones de agar y citocinina.
Fenolización/Oxidación: Prevención con carbón activado, PVP, antioxidantes. Necrosis: Bajar concentración de desinfectantes. Vigor Reducido: Cambiar formulación de medio, ajustar citocinina. |
Medio de Cultivo
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Compuesto por componentes inorgánicos y orgánicos, reguladores de crecimiento y agentes gelatinizadores.
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Esterilización de Medios de Cultivo
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15-20 psi/121°C/20 min.
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Suspensiones Celulares:
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Células libres en medio líquido.
Uso en propagación, metabolitos secundarios, embriones somáticos, protoplastos. |
Callo
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Masa amorfa de células en medio sólido, con potencial de desarrollo de órganos.
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Metabolitos Secundarios:
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Sustancias de defensa y otros usos en las plantas.
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Semilla artificial
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Embrión recubierto por endospermo artificial para propagación masiva.
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Protoplastos
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Células sin pared, usadas para fusión y manipulación genética.
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Control de Contaminación en Protoplastos
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Fusión y transformación genética para modificar células.
Regeneración de plantas transformadas. |