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52 Cartas en este set
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qué son las técnicas citológicas e histológicas
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conjunto de procedimientos que permiten preparar células, tejidos o fracciones celulares para su reconocimiento o estudio.
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cuáles son las técnicas a utilizarse
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técnicas corrientes y técnicas especiales
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para qué sirven las técnicas corrientes
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para el examen inmediato o para el examen mediato
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qué es el examen directo o inmediato
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Un examen que permite que las células, como por los espermatozoides, las células sanguíneas , las células descamadas, los seres unicelulares y pluricelulares inferiores, puedan examinarse directamente al microscopio óptico.
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cuáles son las coloraciones usadas en el examen directo o inmediato
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coloración vital y supravital
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qué es la coloración vital
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cuando se introducen el organismo vivo sustancias atóxicas a fin de que se tiñan algunas células
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cuáles son los tres tipos de coloración vital
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azul tripan, azul pirrón o Carmín
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para qué se utiliza la coloración vital
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para apreciar cortes de tejidos frescos que contengan células en el colorante incorporado
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qué es la coloración supravital y cuáles son sus tipos
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consiste en extraer células vivas de un organismo y fuera de este colorearlas usando los colorantes atóxicos.
Rojo neutro, azul de metileno y verde janus |
cuál es el equipo ideal para el examen inmediato
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microscopio de contraste de fases o el de interferencia
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Cuándo se da el examen mediato
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cuando los tejidos y órganos se cortan en láminas finas y se someten a la acción de los colorantes.
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cuáles son las etapas que se aplican para la microscopía óptica
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1. obtención de la muestra
2. fijación 3. corte 4.coloración y montaje |
obtención de la muestra
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cuando se extirpan pequeños trozos de tejido vivo que no tiene un espesor mayor de 1 cm
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fijación
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Es un procedimiento por el cual el tejido se conserva en condiciones muy similares a las que tenía en vida
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cuáles son los fijadores más utilizados
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el formol en solución al 10%, el alcohol absoluto y las mezclas fijadoras
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cuáles son los dos tipos de mezclas fijadoras
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1. el fijador de bouin (ácido acético, ácido pícrico, formol)
2. el Zenker (bicarbonato de potasio, bicloruro de mercurio, ácido acético) |
en qué radica la acción de los fijadores
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radica en la coagulación de las proteínas ya que aumenta la consistencia de los tejidos y se inactivan las enzimas
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qué son los mordientes
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sustancias que favorecen la coloración posterior presente en algunos fijadores
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corte
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consiste en obtener láminas muy delgadas de 5 a 10 micras de espesor con un aparato llamado microtono
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qué se debe hacer antes de realizar un corte
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endurecer y darle consistencia a los tejidos
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cuáles son los materiales más usados para darle cohesión a los tejidos
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la parafina, la celulina y en algunos casos la gelatina
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cuáles son los pasos para realizar un corte con previa inclusión en parafina
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a. deshidratación de la muestra fijada
b. aclaramiento c. inclusión en parafina d. confección de los bloques |
a. deshidratación de la muestra fijada
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los tejidos sacados del fijador se lavan en agua corriente y luego se deshidratan pasándolos por alcoholes de graduación creciente, de 50%, de 95% y de 100%.
La deshidratación debe ser gradual para evitar alteraciones estructurales |
b. aclaramiento
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una vez que la muestra está deshidratada se introduce en una sustancia misible en alcohol y que disuelva la parafina, cómo el xilol y el cloroformo.
al cabo de unas horas el aclarante penetra al interior del tejido y se desplaza por completo el alcohol |
c. inclusión en parafina
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se debe introducir la muestra en un depósito con parafina líquida (58°C)
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d. confección de los bloques
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se coloca parafina en moldes especiales y en ellos se introduce la muestra orientada en el sentido que se desea cortar y se deja solidificar de esta manera se obtiene el bloque, listo para ser cortado
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coloración
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los cortes colocados en una lámina portaobjetos y adheridos a la misma mediante albúmina de huevo son coloreados según las necesidades de la observación
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cuál es la tinción más utilizada
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la hematoxilina eosina
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cuáles son los pasos a seguir para la coloración con hematoxilina eosina
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1.desperafinado de los cortes
2.hidratación gradual 3.coloración con hematoxilina 4. lavado en agua corriente 5. coloración con eosina 6.la deshidratación gradual 7. aclarado en xilol 8. el montaje |
Desparafinado de los cortes
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mediante el xilol la parafina que sirvió para permitir el corte, debe ser retirada para que penetra el colorante
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hidratación gradual
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con el acohol de 100%, de 95%, agua destilada
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coloración con hematoxilina
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tiene los núcleos de color azul o púrpura oscuro
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lavado en agua corriente
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retira el exceso de colorante y cambia el tono del color (viraje)
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coloración con eosina
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tiñe el citoplasma de color rosado
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deshidratación gradual
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alcoholes de 95% al alcohol de 100%
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montaje
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Se aplica bálsamo de Canadà (resina disuelta en xilol) sobre el preparado todavía humedecido por el xilol y luego se coloca una laminilla cubre objetivos, se presiona y deja secar.
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cómo se llama las sustancias de las células o tejidos que tienen afinidad por los colorantes ácidos (eosina, anaranjado G, fucsina ácida)
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acidófilas
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cómo se llaman las sustancias de las células o tejidos que tienen afinidad por los colorantes básicos (fucsina básica, safranina,verde de metilo, hematoxilina de Harris, etc)
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basófilas
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técnica para la preparación a usarse con el microscopio eléctrico
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a. obtención de las muestras
b.fijación c. corte d. coloración |
obtención de las muestras
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deben ser muy frescas y no deben transcurrir más de 4 minutos desde que se retiran del organismo ya que pueden producirse cambios estructurales
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fijación
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las muestras a fijarse deben ser muy pequeñas en forma de cubos de 1 a 2 mm de lado
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cuáles son los fijadores más usados
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tetraóxido de osmio y el glutaraldehido
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corte
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los cortes deben tener un espesor de 20 a 100 nanómetros y para lograrlo se utilizan los ultramicrótonos que están previstos de cuchillas de vidrio o de diamante
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coloración
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se da este nombre al tratamiento del corte con vapores o soluciones de metales pesados como el acetato de uranilo o el hidróxido de plomo
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cuáles son los fijadores que también pueden actuar como colorante
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el ácido ósmico y el ácido fosfo-túngstico
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qué sucede cuando se utiliza el sombreado con vapores de oro o platino
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se unen a diferentes compuestos de las células y tejidos los vuelven más opacos a los electrones
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cuál es el primer paso de de la técnica congelación o fractura
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congelación de la muestra en freón o nitrógeno líquido a temperaturas menores de -100 grados a -155 grados
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cuál es el segundo paso de de la técnica congelación o fractura
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fractura del tejido utilizando una cuchilla u hoja de afeitar generalmente la fractura ocurre a nivel de las membranas celulares
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cuál es el tercer paso de de la técnica congelación o fractura
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sublimación al vacío del agua congelada que se encuentra a nivel de la superficie expuestas dejando un dibujo en bajo relieve
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cuál es el cuarto paso de de la técnica congelación o fractura
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cubrir las superficies con un depósito delgado de platino y carbón, lo que produce que los vapores de metal sean nebulizados desde determinada dirección lo que produce un efecto de sombreado.
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cuál es el quintopaso de de la técnica congelación o fractura
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colocar la muestra en ácido clorhídrico con el fin de destruir la sustancia orgánica, quedando únicamente la película metálica que se examina al microscopio eléctrico
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cuáles son las técnicas para observar células vivas o estudiar funciones de sus componentes
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exteriorización y transluminación de órganos
cámaras transparentes cultivo de células micromanipulación y microcirugía |