Células eucariontes	poseen un núcleo que contiene la mayoría del ADN envuelto en una membrana
Citoplasma	-aquí ocurren las reacciones metabólicas - contiene a los organelos
Nucleo	-Es el organelo más grande de la célula - separado del citoplasma por una envoltura nuclear de 2 capas - contiene todo el ADN cromosomas, que se encuentra compactado en fibras de cromatina
R.E.R	- asociado a ribosomas que se unen en su parte externa - síntesis de proteinas
R.E.L	-constituido por tubulos irregulares ramificados que no contienen ribosomas - síntesis de Lipidos
Ribosomas	- complejos de ARN y proteinas - se componen de una subunidad mayor y subunidad menor que se ensamblan para formar un complejo - su función : traducción en la síntesis de proteinas
Mitocondrias	- organelo de dos membranas ( espacio intermembrana y matriz mitocondrial) - contienen su propio ADN -sintetisan proteínas y pueden dividirse en 2 - Respiración celular y producción de energía
Cloroplasto	- corresponden a plásticos que tienen clorofila y están rodeados de una doble membrana - contiene su propio ADN - fotosíntesis
Aparato de Golgi	- se encarga de la modificación, destinación, empaquetamiento de moléculas de secreción - alrededor de el se encuentran vesículas de transporte
Lisosomas	- vesículas que contienen enzimas hidroliticas requeridas para la digestión de moléculas en la celula
Peroxisoma	- vesícula donde se produce el peróxido de hidrógeno
Citoesqueleto	- constituido por filamentos de proteinas - formada x microtúbulos, filamentos de actuar y filamentos intermedios - le da forma a la célula
Membrana plasmática	- bicapa de fosfolipidos con proteínas integrales y periféricas
Objetivo General del Laboratorio	Comprender el funcionamiento de la técnica de fraccionamiento subcelular por medio del rompimiento de la célula y la separación de los organelos mediante un campo gravitacional
Fraccionamiento subcelular	-permite obtener componentes celulares aislados, en grandes cantidades y con alto grado de pureza
Primer paso de fraccionamiento subcelular	ruptura y homogenización de la muestra -se puede hacer mediante la sonicacion, shock osmotico o moliendo las células en homogenizadores mecánicos, en esta etapa se rompen los reticulos endoplasmaticos y la membrana plasmática - la suspención de células rotas es llamada "lisado" u "homogeneizado"
segunda etapa del fraccionamiento	- serie de etapas sucesivas de centrifugación en las que los componentes de las células se separan en un campo gravitatorio
Centrifugas	instrumentos que sirven para aumentar el campo gravitatorio
Campo gravitatorio	- depende del radio de giro y de la velocidad de rotación
Pellet	también llamado sedimento, es lo que está al fondo del tubo
Sobrenadante	parte líquida que se ubica en la parte superior del tubo
Primera etapa de separación	- consiste en una centrifugación a baja velocidad - sedimentan solo las células enteras y núcleos
Segunda etapa de separación	- el sobrenadante se somete a una segunda centrifugación a velocidades intermedias en la que sedimentan mitocondrias, cloroplastos, lisosomas y peroxisomas
tercera separación	- el sobrenadante se vuelve a centrifugar con alta velocidad, obteniendo un pellet enriquecido de membrana plasmática y reticulo endoplasmatico
Última Separación	- última centrifugación del sobrenadantez a velocidades aún mayores que las demás, -Sedimentan los ribosomas

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