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¿Cuál es el transporte que nos interesa en el núcleo?
Transporte con barrera; regula el complejo poro-nuclear regulado por señales de transporte regular
¿Cuáles son las zonas donde el interior es equivalente?
- Golgi y retí**** endoplasmático
- Espacio internuclear y retí**** endoplasmático
¿Cuáles son las zonas donde el interior no es equivalente?
- Citoplasma y lumen; porque hay una bacteria o proteína de transporte
¿Qué permite el poro nuclear?
Permite el trafico selectivo de proteínas y macromoléculas manteniendo la composición interna y regulando los procesos biológicos
¿Qué es el complejo del poro nuclear?
Es un complejo proteico formado por:
- Más de 1000 proteínas y con un gran peso molecular, -- 30 tipos de nucleoporinas diferentes
¿Qué tienen las células?
- Gran cantidad de CPN, unos 3000 por células todo y que depende de la actividad
- Transporte muy grande y bidireccional, 1000 macromoléculas por segundo
¿Con qué están relacionadas estructuralmente las nucleoporinas?
Está relacionada estructuralmente con:
- Clatrina
- COPI
- Coátomero
¿Cuál es la estructura básica del complejo del poro nuclear?
- Anillo citosólico y nuclear
- Canal central
- Fibras citosólicas
- Cesta nuclear
¿Qué son las fibras citosólicas?
Son filamentos largos de nucleoporinas que se mueven para atraer las macromoléculas; ayudan a recoger proteínas
¿De qué están formados los anillos y el canal central?
Están formados por nucleoporinas estructurales para el esqueleto y nucleoporinas de la membrana para el anclaje
¿De qué está formado el canal central?
Está formado por:
- Nucleoporinas FG, que entapizan el canal central y regulan el paso
- 16 complejos Y; 7 nucleoporinas estructurales
¿Dónde están localizados los 16 complejos Y?
- 8 en la cara interior
- 8 en la cara citosólica
¿Cómo es el canal central?
Tiene una simetria octogonal y un canal expansible
¿De qué está lleno el interior del canal central?
Está lleno de una matriz geliforme; hace de barrera pero deja pasar las cosas
¿De qué están hechas las nucleoporinas FG?
Están hechas a partir de secuencias hidrofóbicas de Phe y Gly
¿Cómo es la cesta nuclear?
Es un complejo para recoger y dirigir las macromoléculas que entran
¿Cómo se puede encontrar el transporte nuclear?
Se puede encontrar de dos tipos dependiendo del tamaño
- Transporte pasivo
- Transporte activo
¿Cómo es el transporte pasivo?
- Lleva moléculas pequeñas
- Transporte de difusión
- No consume energia
- No está regulado
- El paso es de una molécula cada vez
- Transporta moléculas hidrosolubles
¿Cómo es el transporte activo?
- Lleva moléculas grandes
- Transporte regulado
- Consume energia
- Requiere de proteínas transportadores y una secuencia señal
¿Qué tipos de proteínas son importadas al núcleo?
- Proteínas ribosómicas
- Factores de transcripción
- Histonas
- Hormonas
- Polimerasas
¿Qué tipos de macromoléculas son exportadas?
- ARNs nucleares
- Ribonucleoproteínas
- Subunidades ribosómicas
¿Cómo se observa el transporte nuclear?
Se usa una microscopia que usa un elemento muy denso; el oro coloidal
¿Qué se necesita para poder iniciar el transporte del citoplasma al núcleo?
Una secuencia de aminoácidos
¿Cómo es la secuencia de aminoácidos iniciadora de transporte?
Es una secuencia corta de 4 a 8 aminoácidos (NLS), hay básicos como Lys o Arg con carga básica
¿Cómo se reconoce la secuencia de aminoácidos iniciadora de transporte?
Se reconoce por proteínas que facilitan el transporte
¿Dónde se puede encontrar la secuencia específica de importación nuclear?
Se puede encontrar en cualquier lugar de la célula, si se encuentra en un complejo multiproteíco se importa en todo el complejo
¿Qué ocurre si hay una mutación en las señales que evitan la importación nuclear?
Ocurren patologías
¿Cómo son las señales de exportación del núcleo al citoplasma?
Es una secuencia reconocida por proteínas que facilitan el transporte, consiste en una secuencia corta de 9 a 11 aminoácidos abundantes en aminoácidos hidrofóbicos
¿Qué función tienen las proteínas citosólicas?
Permeabilizan la membrana para el transporte celular; digitonina
¿Qué ocurre en las células no tratadas?
No pueden realizar el transporte nuclear de proteína NLS si no se les proporciona un lisado citoplasmático, también se necesita receptores de transporte nuclear y Ran para poder hacer el transporte nuclear
¿Qué son los receptores de la exportación nuclear?
Son las exportinas y sirven para el transporte N-C, se reconoce mediante las exportinas a través de las NES
¿Cuáles son los receptores de la importación nuclear?
Son las importinas; para el transporte C-N la proteína es reconocida por las importinas a través de NLS
¿Cómo se ve afectado el transporte a través de los poros nuclear?
Se ve afectado por las nucleoporinas y los filamentos flexibles
¿Qué es la proteína Ran?
Es una proteína G monomérica necesaria para el transporte activo
¿Qué dos conformaciones tiene la proteína Ran?
- Ran-GDP: alta concentración en el citosol por culpa del GAP
- Ran-GTP: elevada concentración en el núcleo debido a GEF
¿Qué reconoce la proteína-NLS citoplasmática?
Una importina que se junta con la proteína y un complejo de proteína e importina se transloca al núcleo
¿Qué ocurre en la importación nuclear?
- Hay una interacción Ran-GTP y la importina produce una liberación de proteínas
- El complejo importina-Ran-GTP se transloca en el citoplasma
- La GAP pasa la Ran-GTP a Ran-GDP provocando la aliberación de la importina
¿A qué se une la Ran-GTP?
A una exportina, eso provoca la unión a la proteína NES
¿Qué ocurre en la exportación nuclear?
- Complejo formado por Ran-GTP-exportina y proteína se transloca al citoplasma
- GAP provoca la hidrolisis de Ran-GTP a Ran-GTP
- Provoca la liberación de la exportina que se vuelve a translocar en el núcleo
¿Qué provoca la Ran-GTP?
Provoca la liberación en la importación y la unión de la exportación
¿Qué provoca la Ran-GDP?
Produce la liberación en la exportación y unión en la importación
¿El transporte nuclear puede estar regulado?
¿Cómo está el complejo NF-kappaB/IkappaB en el citosol?
Inactivo
¿Cómo está el complejo NF-kappaB/IkappaB en situación normal?
Tiene un inhibidor
¿Qué ocurre cuando hay una degradación de ikappaB?
Hay una exposición de NLS; la importina se puede unir a NLS y conducir a la importación nuclear a través del poro
¿Qué requiere el transporte el ARNs al citoplasma?
Necesitan factores de transporte como exportinas y Ran-GTP, excepto el ARNm que no requiere de Ran
¿Cómo funciona el transporte de ARNm?
De la cromatina se transcribe y se empaqueta el ARNm mediante unión de proteínas, formando complejos ribonucleoproteicos heterogeneos nucleares no procesados
¿Qué ocurre después del procesamiento del pre-ARNm?
Se forma el RNPm
¿Cómo es el transporte del RNPm al citoplasma?
Se desenrrolla para pasar por el poro nuclear y se exporta sin gasto energético, en el citoplasma se asocia con los ribosomas pasando por el extremo 5'
¿Cuáles es la enfermedad asociada al transporte nuclear?
Enfermedad de Hunitington
¿Qué es la enfermedad de Hunitington?
Es una enfermedad neurodegenerativa; la proteína huntingtina contiene una señal NES, si la proteína muta se observa que la leucina no se exporta al citoplasma y forma aglomeraciones y induce a la muerte neuronal
¿Cuál es la aplicación médica del transporte nuclear?
El virus utiliza una maquinaria de transporte nuclear de la célula para importar el complejo de preintegración de virus, dentro del núcleo y así se puede replicar; creación de nuevas terapias contra el VIH que bloqueen la importación del complejo
¿Cómo se realizan las terapias que bloquean la importación del complejo?
- Inhibiendo las importinas
- Uniéndose a la NLS de alguna proteína vírica
¿Qué proteína transportadora se estaba investigando inhibir en el cáncer?
La XPO1